32三浦 佳子23Yoshiko MIURA末吉 健志24Kenji SUEYOSHI精密高分子合成を基盤とした、病原体捕捉材料の開発と活用 (2015年採択)Materials for Pathogen Removal Based on the Precise Polymerization (Project 2015)三次元デジタル電気泳動法に基づく新規ブロッティング分析法の開発と細胞内薬物動態解析への応用 (2015年採択)Development of a novel blotting analysis based on three-dimensional digital electrophoresis and application to a pharmacokinetic analysis in a cell (Project 2015)structures. The encapsulated hepatic cells were interacted with the surrounding other cells and differentiated into mature hepatocytes during perfusion culture. Furthermore, the fabricated vascular-like structures were connected to in vivo vasculatures and implanted in mice, indicating the fabricated tissues were functional in vivo for at least 24 hours.高分子の側鎖に糖鎖を結合させた生体機能性高分子である糖鎖高分子について，リビング重合に分子の構造を精密に制御して，糖鎖認識タンパク質への制御を行った．糖鎖を認識するタンパク質は規則的に糖鎖認識サイトが配置する多量体のタンパク質である．リビングラジカル重合を利用して糖鎖高分子の鎖長の制御，ブロック共重合体の導入によって，糖鎖間隔に適合した高分子を設計した．高分子が特異的で強い結合を示すことを明らかにした．また，モノマーのラジカル反応性を明らかにした上で，クリックケミストリーによってオリゴ糖鎖を導入できるアクリルアミドを開発し，シアル酸オリゴ糖鎖を導入した高分子ではインフルエンザウイルスに対する強い阻害活性を示した．In this investigation, we prepared the glycopolymer with controlled polymerization with living radical po-lymerization method, where glycopolymers are the polymers with pendant saccharides. The sugar recognition proteins have subunit structure and the sugar recognition site in the proteins are located in a certain distance. We prepared the glycopolymers with the controlled sugar distance using glyco-block-polymers, and found the molecular recognition ability of sugar-protein interaction could be designed by the block polymer. We also prepared the new method to prepare the defined glycolypolymer with a new type of alkyne acrylamide. The new type of polymer with sialyl lactose showed the strong inhibitory activity to in influenza virus.本研究では，従来のウエスタンブロッティングによる生体試料中タンパク質の分離能および検出感度の向上を目的として，機能性ヒドロゲルを用いるデジタル電気泳動法の開発とその多次元化について検討した．まず，異なる機能性官能基が導入されたヒドロゲルの分離能を評価し，一次元および二次元デジタル電気泳動へと展開した．さらなる多次元化を目指し，機能性ヒドロゲル充填キャピラリーカートリッジを任意の順番で接続する多次元電気泳動デバイスを新規に作製した．その結果，異なる分離機能を有するカートリッジを任意に組み合わせた異種分離原理混合モードに基づくデジタル分離が実現され，デジタルブロッティング分析が可能であることが示唆された．A multidimensional digital electrophoresis device was newly developed to improve resolution and sensitivity of protein analysis in complex biogenic samples as compared to a conventional western blotting assay. Sepa-ration efficiency of various functionalized-hydrogels were evaluated, and these hydrogels were applied to one- or two-dimensional digital electrophoresis devices. To realize multi-dimensional digital electrophoresis, capillary cartridges filled with a different functionalized-hydrogel were newly developed. The cartridges were easily connected each other, providing the designable digital electrophoresis device containing various sepa-
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